蛋白酶 K
[CAS# 39450-01-6]

基本信息

• 产品分类: 生物化工 >> 酶及辅酶类药
• 英文名: Proteinase K
• 别名: Endopeptidase K; Prok; Protease K; Tritirachium album proteinase K
• 产品名称: 蛋白酶 K
• 分子量: ~28930
• CAS 登录号: 39450-01-6
• EC 号码: 254-457-8

物理化学性质

• 溶解度: h2o: 溶解 1 mg/mL (实验值)

安全数据

• 危险品标志: GHS07;GHS08 Danger
• 危害标签: H315-H317-H319-H334-H335
• 防护标签: P233-P260-P261-P264-P264+P265-P271-P272-P280-P284-P302+P352-P304+P340-P305+P351+P338-P319-P321-P332+P317-P333+P317-P337+P317-P342+P316-P362+P364-P403-P403+P233-P405-P501

危害分类

危害	分类	类别码	危害标签
呼吸道致敏	Resp. Sens.	1	H334
皮肤刺激	Skin Irrit.	2	H315
眼刺激	Eye Irrit.	2	H319
特定目标器官毒性—单次接触	STOT SE	3	H335

发现和应用

蛋白酶 K 是一种丝氨酸蛋白酶，广泛应用于分子生物学和生物化学领域，用于蛋白质消化。其分子量约为 28.9 kDa，通常以冻干粉末形式提供，可溶于水性缓冲液。蛋白酶 K 在较宽的温度范围（20-60ºC）和 pH 值范围（pH 4-12）内均具有高度稳定性和活性，并且在洗涤剂、尿素和离子变性剂存在的情况下仍保持活性，使其成为一种强大的蛋白质降解工具。

蛋白酶 K 于 20 世纪 70 年代从白曲霉 (*Tritirachium album*) 中发现，并因其广泛的底物特异性和热稳定性而闻名。研究发现，它可以切割脂肪族和芳香族氨基酸羧基旁边的肽键，这使其特别适用于消化变性蛋白质。钙离子可以增强其活性，因为钙离子可以稳定酶的结构，而且它对常见的蛋白酶抑制剂的敏感性低于许多其他蛋白酶。

蛋白酶 K 通常通过白曲霉培养物的发酵生产，然后进行纯化步骤，例如硫酸铵沉淀和色谱法，以去除污染物并分离活性酶。纯化的酶随后进行冻干，得到稳定且保质期长的制剂。目前也已开发出重组表达系统，用于生产具有稳定活性和纯度的蛋白酶 K，以满足研究和工业应用的需求。

从化学角度来看，蛋白酶 K 是一种丝氨酸蛋白酶，这意味着其活性位点含有一个丝氨酸残基，该残基在肽键水解中起着核心作用。其广泛的特异性使其能够切割多种蛋白质，包括变性或紧密折叠的蛋白质。这一特性使其区别于其他蛋白酶，其他蛋白酶可能需要特定的识别序列或天然蛋白质构象。蛋白酶 K 在变性条件下保持稳定，使其能够在 SDS、尿素或盐酸胍存在的情况下消化蛋白质，这在核酸纯化方案中至关重要。

在实际应用中，蛋白酶 K 主要用于分子生物学领域，从核酸制备物中去除蛋白质，从而确保获得高纯度的 DNA 或 RNA，用于下游应用，例如 PCR、克隆和测序。它还用于从组织、细胞和微生物中制备基因组 DNA，以及用于降解可能降解核酸的核酸酶。此外，蛋白酶 K 在蛋白质组学研究中用于生成用于质谱分析的肽片段，并在食品或制药行业用于处理含蛋白质的材料。

从物理性质上看，蛋白酶 K 以冻干粉末形式储存在 -20ºC 下时非常稳定，并且在添加钙离子等稳定剂的水性缓冲液中也能长时间保持活性。应避免反复冻融，因为这会降低酶的活性。处理蛋白酶 K 时必须佩戴手套和防护服，因为蛋白水解酶会对皮肤、眼睛和呼吸系统造成刺激。

总而言之，蛋白酶 K 是一种用途广泛且性能稳定的丝氨酸蛋白酶。其广泛的底物特异性、在变性条件下的稳定性以及在各种缓冲液中都能发挥作用的特性使其成为分子生物学和生物化学领域的关键试剂。该酶独特的化学和物理特性组合使其能够高效降解蛋白质，因此在核酸纯化、蛋白质组学研究以及需要蛋白质水解的工业应用中都不可或缺。